• 9 czerwca, 2022

Wpływ deksametazonu i kwasu acetylosalicylowego na stan zapalny wywołany przez kompletny adiuwant Freunda u golca nagiego (Heterocephalus glaber)

Nagi golowiec (NMR) to gryzoń grzebieniasty, w przypadku którego zaobserwowano, że ma unikalny system nocyceptywny w porównaniu z innymi. W tym badaniu zbadaliśmy charakterystykę przewlekłego stanu zapalnego w NMR przy użyciu kompletnego adiuwantu Freunda (CFA) i zbadaliśmy wpływ deksametazonu i kwasu acetylosalicylowego na powstałe zapalenie. Do NMR wstrzyknięto podskórnie 0,1 ml CFA w prawą tylną łapę, a grupie kontrolnej wstrzyknięto równoważną objętość normalnej soli fizjologicznej.

W ciągu 24 godzin od wstrzyknięcia zaobserwowano obrzęk kończyny tylnej prawej, której wstrzyknięto, obejmujący staw piszczelowo-stępowy, powierzchnię dłoniową i palce łapy, w którą wstrzyknięto. Obrzęk utrzymywał się przez 6 tygodni eksperymentów i osiągnął szczyt między 14 a 21 dniem. Powstały stan zapalny wpłynął na ruchliwość, postawę i sztywność stawów NMR traktowanych CFA w porównaniu z grupą kontrolną. Leczenie przewlekłej fazy zapalenia od 11 dnia deksametazonem  i kwasem acetylosalicylowym nie wykazało statystycznie istotnego znaczenia w obwodzie łapy w porównaniu z grupą kontrolną, poza kilkoma nieistotnymi okazjami.

Obecne dane wykazały, że CFA był w stanie wywoływać przewlekłe zapalenie w NMR, a zatem NMR można było ustalić jako model przewlekłego zapalenia.

Do oceny działania leków przeciwzapalnych potrzebne są jednak bardziej czułe parametry

  • Głównym celem niniejszej pracy jest określenie klinicznego wpływu nirantyny na trzewny lub somatyczny ból zapalny. Badanie przeprowadzono w celu określenia wpływu nirantyny na trzewną lub somatyczną nadwrażliwość zapalną dorosłych szwajcarskich myszy albinosów przy użyciu kompletnego modelu bólu wywołanego adiuwantem Freunda (CFA).
  • Wpływ wstrzykiwania CFA określono po 24 godzinach wstrzykiwania przy użyciu estezjometru, takiego jak włókna Von Freya, w celu oceny dotykowego chłodzenia wywołanego acetonem i wrażliwości termicznej. Do pomiaru obrzęku łapy użyliśmy cyfrowego pletyzmometru.
  • Pojedynczą dawkę dootrzewnowej iniekcji nirantyny (5 i 10 mg/kg) wstrzyknięto myszom z nadwrażliwością mechaniczną indukowaną przez CFA i po 30 minutach podawania zaobserwowano zmniejszoną nadwrażliwość mechaniczną . Ponadto nirantyna zmniejszyła również nadwrażliwość wywołaną acetonem w ciągu 4 godzin. W porównaniu z DMSO, nirantyna była najbardziej aktywna w zmniejszaniu obrzęku łap wywołanego przez CFA.
  • Aby zmniejszyć nadwrażliwość mechaniczną, podawano wielokrotne dawki nirantyny (bis in die (bid)) od 1 do 5 dnia oraz dnia 2 do 9 i 10) i zaobserwowano niezwykłe wyniki, takie jak brak tolerancji przy wielokrotnym dawkowaniu i znaczne zmniejszenie CFA nadwrażliwość indukowana.
  • Praca ta wykazała, że ​​nirantyna ma działanie antynocyceptywne i wskazuje, że nirantyna jest konwencjonalnie aktywna w radzeniu sobie z uporczywym bólem.

 

Kompletny adiuwant Freunda (CFA) stosowano do rozwoju stanu zapalnego lub artretycznego u zwierzęcia, ale brak jest informacji dotyczących wysokich dawek CFA dotyczących zachowań nocyceptywnych i parametrów zapalnych.

To badanie miało na celu porównanie wpływu różnych wysokich dawek CFA u szczura na ściśle naśladujące parametry nocyceptywne i zapalne reumatoidalnego zapalenia stawów (RZS) u ludzi. Dwadzieścia cztery samce szczurów rasy Sprague-Dawley podzielono losowo na cztery grupy (n = 6): kontrolna (C), grupy z zapaleniem wielostawowym indukowanym CFA przy 5,0 mg/ml (CFA 5,0), 7,5 mg/ml (CFA 7,5) i 10,0 mg/ml (CFA 10,0).

Prawą tylną łapę szczurów zaszczepiono śródskórnie CFA i rozwinęła się ona w stan wielostawowy w ciągu 20 dni. Ocenę nocyceptyjno-behawioralną, w tym testy von Freya i gorącej płytki oraz spontaniczną aktywność, przeprowadzono w dniach 0, 7, 15 i 20. Obustronne badanie średnicy i obwodu stawów skokowych, pełną morfologię krwi, badania histologiczne stawów i łap prowadzono również przez cały okres badania .

Na podstawie wyników grupy CFA 5.0 i CFA 7.5 wykazały znaczny wzrost aktywności spontanicznej i rozwój hiperalgezji termicznej, ale bez zmiany masy ciała i przyjmowania pokarmu, brak rozwoju allodynii dotykowej i wskaźników hematologicznych oraz brak istotnych zmian morfologicznych w histologii stawów . Tymczasem grupa CFA 10.0 wykazała istotne i stałe zmiany we wszystkich badanych parametrach nocyceptywnych i zapalnych. Podsumowując, CFA w dawce 10 mg/ml ma najbardziej potencjalną i niezawodną dawkę do rozwoju zapalenia wielostawowego w modelu szczurzym, naśladującego stan RZS u ludzi.

Zapalenie stawów jest najczęstszą przyczyną przewlekłego bólu. Toksyna botulinowa typu A (BoNT/A) jest szeroko stosowana w leczeniu przewlekłego bólu.

W naszym poprzednim badaniu potwierdziliśmy przeciwzapalne i antynocyceptywne działanie BoNT/A w modelu zapalenia stawów wywołanego kompletnym adiuwantem Freunda (CFA), ale leżący u podstaw mechanizm przeciwzapalny nie został w pełni wyjaśniony . Celem tego badania było zbadanie działania przeciwzapalnego i mechanizmów BoNT/A na zapalenie stawów za pomocą analizy transkryptomicznej.

BoNT/A wstrzyknięto do stawu skokowego szczura w dniu 21 po wstrzyknięciu CFA. Do oceny zachowań związanych z bólem w różnych punktach czasowych zastosowano testy von Freya i gorącej płyty. Pięć dni po traktowaniu BoNT/A przeprowadzono profilowanie ekspresji genów w zwoju korzenia grzbietowego (DRG) przy użyciu sekwencjonowania RNA (sekwencja RNA). Geny o zróżnicowanej ekspresji (DEG) analizowano różnymi narzędziami. Alodynia mechaniczna i hiperalgezja termiczna uległy znacznemu odwróceniu po wstrzyknięciu BoNT/A.

Freund's Adjuvant, Complete

abx082397-10ml Abbexa 10 ml 243.6 EUR

Freund's Complete Adjuvant (Suspension)

VAdv-Ly0004 Creative Biolabs 10 mL 1663.2 EUR

Freund's Complete Adjuvant (Pellet)

VAdv-Ly0005 Creative Biolabs inquire Ask for price

Freund's Complete Adjuvant (Solution)

VAdv-Ly0006 Creative Biolabs 5 mL 390 EUR

Complete Freund's Adjuvant, 5 mg/ml

7023 Chondrex 5 mg/ml x 5 ml 213.12 EUR

Complete Freund's Adjuvant, 20 mg/ml

7024 Chondrex 20 mg/ml x 5 ml 472.38 EUR

Complete Freund's Adjuvant, 10 mg/ml

7027 Chondrex 10 mg/ml x 5 ml 280.98 EUR

Freund's Adjuvant, Incomplete

abx082064-10ml Abbexa 10 ml 243.6 EUR

Freund's Incomplete Adjuvant

VAdv-Ly0008 Creative Biolabs 50 mL 666 EUR

Complete Freund?s Adjuvant (CFA);vaccine adjuvant

AV-3010-10 Alpha Diagnostics 10 ml 343.2 EUR

Complete Freund?s Adjuvant (CFA);vaccine adjuvant

AV-3010-100 Alpha Diagnostics 10x10 ml 489.6 EUR

Alum Adjuvant

VAdv-Ly0002 Creative Biolabs 50 mL 1663.2 EUR

Incomplete Freund?s Adjuvant (IFA);vaccine adjuvant

AV-3015-10 Alpha Diagnostics 10 ml 343.2 EUR

Incomplete Freund?s Adjuvant (IFA);vaccine adjuvant

AV-3015-100 Alpha Diagnostics 10x10 ml 489.6 EUR

Ipgbox Complete

28933465 Scientific Laboratory Supplies EACH 401.28 EUR

Saponin Vaccine Adjuvant

VAdv-Ly0009 Creative Biolabs 1 g 1314 EUR

Recombinant flagellin FlicC vaccine adjuvant (TLR5 agonist); vaccine adjuvant

AV-7010-50 Alpha Diagnostics 50 ug 1074 EUR

MD600 MaxiDirect Complete

WAT2024 Scientific Laboratory Supplies EACH 1181.04 EUR

Transformer plate complete

WAT4804 Scientific Laboratory Supplies EACH 572.28 EUR

Pressure transducer complete

WAT4820 Scientific Laboratory Supplies EACH 964.44 EUR

Calcium phosphate vaccine adjuvant

AV-1020-100 Alpha Diagnostics 100 ml 262.8 EUR

Peanut Oil vaccine adjuvant

AV-5010-50 Alpha Diagnostics 50 ml 270 EUR

Mineral Oil vaccine adjuvant

AV-5020-50 Alpha Diagnostics 50 ml 270 EUR

Mannide monooleate vaccine adjuvant

AV-5030-5 Alpha Diagnostics 5 g 196.8 EUR

HS15 Kolliphore vaccine adjuvant

AV-6010-100 Alpha Diagnostics 100 g 343.2 EUR

Pam2CSK4 vaccine adjuvant, unlabeled

AV-9020-1 Alpha Diagnostics 1 mg 489.6 EUR

Pam3CSK4 vaccine adjuvant, unlabeled

AV-9025-1 Alpha Diagnostics 1 mg 343.2 EUR

TLR2 & NOD2-Based Adjuvant

VAdv-Ly0016 Creative Biolabs 5 mg 4016.4 EUR

Flystuff (59-122BC) Flow Buddy Complete system FlowBuddy Complete

FLY1038 Scientific Laboratory Supplies EACH 929.1 EUR

Vaccigel Alum adjuvant (2% Aluminum hydroxide, ready to use), Vaccine adjuvant

AV-1010-50 Alpha Diagnostics 50 ml 343.2 EUR

Vaccigel AlumPhos adjuvant (2% Aluminum phosphate, ready to use), Vaccine adjuvant

AV-1015-50 Alpha Diagnostics 50 ml 270 EUR

Vaccigel Alum adjuvant adsorbed with Lipopolysaccharide (LPS @1 mg/ml), Vaccine adjuvant

AV-1010-LPS Alpha Diagnostics 1 ml 489.6 EUR

Vaccigel Alum adjuvant adsorbed with Ovalbumin (OVA @1 mg/ml), Vaccine adjuvant

AV-1010-OVA Alpha Diagnostics 1 ml 270 EUR

Peptidoglycan (S. aureus); vaccine adjuvant

AV-7045-25 Alpha Diagnostics 25 mg 1220.4 EUR

Peptidoglycan (S. aureus); vaccine adjuvant

AV-7045-5 Alpha Diagnostics 5 mg 343.2 EUR

RWJ 21757 Synthetic vaccine adjuvant

AV-9010-1 Alpha Diagnostics 1 mg 196.8 EUR

RWJ 21757 Synthetic vaccine adjuvant

AV-9010-5 Alpha Diagnostics 5 mg 343.2 EUR

Pam2CSK4 vaccine adjuvant; Biotin conjugate

AV-9020-B Alpha Diagnostics 1 mg 489.6 EUR

Pam2CSK4 vaccine adjuvant; Biotin conjugate

AV-9020-B-100 Alpha Diagnostics 100 ug 196.8 EUR

Pam3CSK4 vaccine adjuvant; Biotin labelled

AV-9025-B Alpha Diagnostics 100 ug 416.4 EUR

Pam3CSK4 vaccine adjuvant; FITC labelled

AV-9025-F Alpha Diagnostics 100 ug 416.4 EUR

Direct PCR Complete Kit

S700 GeneOn 100 rcs 159.6 EUR

Direct PCR Complete Kit

S700-2 GeneOn 5x100 rcs 628.8 EUR

MK TETRATHIONATE NOVO COMPLETE

MED1114 Scientific Laboratory Supplies PK50 48.79 EUR

90ML SequaGel Complete Buffer

NAT1156 Scientific Laboratory Supplies 90ML 23.83 EUR

Foot Pedal Complete System

FLY1234 Scientific Laboratory Supplies EACH 706.8 EUR

Capillary Pipette Filler Complete

PIP3152 Scientific Laboratory Supplies PK10 41.5 EUR

Controler board Kyro complete

WAT4812 Scientific Laboratory Supplies EACH 1399.92 EUR

Sample holder Gonotec complete

WAT4814 Scientific Laboratory Supplies EACH 1291.62 EUR

Eye Wash Cabinet Complete

SAF2420 Scientific Laboratory Supplies EACH 32.15 EUR

Vaccigel Alum adjuvant adsorbed with Bovine Serum Albumin (BSA @1 mg/ml), Vaccine adjuvant

AV-1010-BSA Alpha Diagnostics 1 ml 343.2 EUR

Vaccigel Alum adjuvant adsorbed with Keyhole limpet hemocyanin (KLH @1 mg/ml), Vaccine adjuvant

AV-1010-KLH Alpha Diagnostics 1 ml 343.2 EUR

Lipopolysaccharides (LPS) (Salmonella typhimurium) vaccine adjuvant

AV-7020-1 Alpha Diagnostics 1 mg 196.8 EUR

Lipopolysaccharides (LPS) (Salmonella typhimurium) vaccine adjuvant

AV-7020-10 Alpha Diagnostics 10 mg 634.8 EUR

Complete Bacterial Protein Extraction Reagent

AR0157 BosterBio 50mL (sufficient for lysis of 10g of bacterial biomass) 169.2 EUR

VitroPlus III, low serum, complete

PC00B1 Neuromics 500 ml 381.6 EUR

Filtration System 47mm Complete Assembly

5809/KIT Scientific Laboratory Supplies EACH 427.69 EUR

HandEvac Hand Controller Set Complete

ARG1280 Scientific Laboratory Supplies EACH 754.68 EUR

FlexiRack Complete System with Brackets

ARG1740 Scientific Laboratory Supplies EACH 51.41 EUR

Genie 2T Vortex Mixer Complete

MIX5008 Scientific Laboratory Supplies EACH 706.8 EUR

200ML SequaGel UreaGel Complete Buffer

NAT1158 Scientific Laboratory Supplies 200ML 29.75 EUR

Tissue grinder Potter-Elvehjem complete

DD45129 Scientific Laboratory Supplies EACH 430.92 EUR

Eppendorf Concentrator plus complete system

E5305000363 Scientific Laboratory Supplies EACH 7641.42 EUR

Wall-Mount Flowbuddy Complete System

FLY1238 Scientific Laboratory Supplies EACH 889.2 EUR

CrimpCap 20mm Si/PTFE Complete

CHR3174 Scientific Laboratory Supplies PK1000 662.34 EUR

Gear motor for initiation complete

WAT4790 Scientific Laboratory Supplies EACH 377.34 EUR

Reliwash Chemical Splash Station - Complete

SAF1436 Scientific Laboratory Supplies EACH 112.86 EUR

Morpheus Complete 10 ml kit

M-MD1-123 MiTeGen 1 kit kit 4578 EUR

Morpheus Complete HT-96 kit

M-MD1-124 MiTeGen 1 kit kit 1372 EUR

TDB (Trehalose-6,6-dibehenate) Synthetic vaccine adjuvant

AV-9015-2 Alpha Diagnostics 2 mg 489.6 EUR

ExoELISA-ULTRA Complete Kit (CD63 detection)

EXEL-ULTRA-CD63-1 SBI 96 reactions 855.6 EUR

ExoELISA-ULTRA Complete Kit (CD81 detection)

EXEL-ULTRA-CD81-1 SBI 96 reactions 855.6 EUR

Exosome ELISA Complete Kit (CD81 detection)

EXOEL-CD81A-1 SBI 96 reactions 956.4 EUR

MSCGro-Mesenchymal Stem Cell complete, LS

SC00B1-500 Neuromics 500 ml 364.8 EUR

MSCGro-Humanized Mesenchymal Stem Cell, complete

SC00B2-500 Neuromics 500 ml 450 EUR

MSCGro-Mesenchymal Stem Cell, complete, SF

SC00B3-500 Neuromics 500 ml 465.6 EUR

BTD Valve Head Complete 2.5-10mL

DIS6851 Scientific Laboratory Supplies EACH 103.74 EUR

BTD Valve Head Complete 25-100mL

DIS6852 Scientific Laboratory Supplies EACH 134.52 EUR

Cells-to-Cts + QuantiMir complete Kit

RA422A-1 SBI 20 reactions 820.8 EUR

Ecodyst EcoChyll X1 230V COmplete System

EVA1209 Scientific Laboratory Supplies EACH 15918.96 EUR

Power supply unit with ventilator complete

WAT4774 Scientific Laboratory Supplies EACH 831.06 EUR

Vapor wicks complete sets x 10

WAT4856 Scientific Laboratory Supplies PK10 144.78 EUR

HELLMA UV CALIBRATION COMPLETE LIQUID FI

Z802204-1EA Scientific Laboratory Supplies EACH 4446 EUR

Eye Pod Station with mirror complete

SAF1378 Scientific Laboratory Supplies EACH 10.64 EUR

Nalgene Waste Liquid System 140mm Complete

SAF7886 Scientific Laboratory Supplies EACH 124.26 EUR

Nalgene Waste Liquid System 254mm Complete

SAF7888 Scientific Laboratory Supplies EACH 193.8 EUR

Cryo-EM Complete Lab Tool Kit

M-CEM-LCTK1 MiTeGen 1 KIT 43034 EUR

Squalene (oil-in-water nano emulsion);vaccine adjuvant

AV-3020-10 Alpha Diagnostics 10 ml 343.2 EUR

Vet-SAP Vaccine adjuvant, (EU GMP grade) >95%;

AV-4020-100 Alpha Diagnostics 100 mg 196.8 EUR

Vet-SAP Vaccine adjuvant, (EU GMP grade) >95%;

AV-4020-1000 Alpha Diagnostics 1 g 634.8 EUR

Lipopolysaccharides (LPS) (Escherichia coli 0111:B4) vaccine adjuvant

AV-7015-1 Alpha Diagnostics 1 mg 196.8 EUR

Lipopolysaccharides (LPS) (Escherichia coli 0111:B4) vaccine adjuvant

AV-7015-10 Alpha Diagnostics 10 mg 634.8 EUR

VitroPlus III, Serum-Free, Xeno-Free, Complete

PC00B2 Neuromics 500 ml 450 EUR

Biorack 4800 -complete with 2ml racking system

MOL3183 Scientific Laboratory Supplies EACH 6321.3 EUR

Complete OmniPAGE Mini system with electroblotting module

CVS10CBS Scientific Laboratory Supplies EACH 752.4 EUR

Eppendorf Concentrator Plus complete system without rotor

E5305000568 Scientific Laboratory Supplies EACH 7446.48 EUR

Jenway Benchtop pH Meter Model 3540 Complete

PHM1216 Scientific Laboratory Supplies EACH 1461.48 EUR

IKA ROTAVISC Rotational Viscometer lo-vi Complete

VIS2120 Scientific Laboratory Supplies EACH 3522.6 EUR

IKA ROTAVISC Rotational Viscometer me-vi Complete

VIS2122 Scientific Laboratory Supplies EACH 3522.6 EUR

MiTeGen CryoEM G2 - Complete HC34 Starter Kit

M-CEMG2-CSK1-34 MiTeGen 1 KIT 15654 EUR

Sekwencja RNA wykazała 97 stopni pomiędzy grupą CFA a grupą Sham; te DEG były wzbogaconą odpowiedzią zapalną, ścieżką sygnalizacyjną IL-17, itp. Między grupą CFA+BoNT/A a grupą CFA występuje 71 DEG; te DEG były związane z odpowiedzią na peptyd, szlakiem sygnalizacyjnym PI3K-Akt, interakcjami ECM-receptor itp. Trzy kluczowe geny uległy znacznemu zmniejszeniu po indukowanym przez CFA bólu stawów, podczas gdy BoNT/A zwiększył ekspresję tych genów. Identyfikacja genów S100A9, S100A8 i MMP8 może dostarczyć nowych celów terapeutycznych dla bólu stawów i wpłynąć na szlak sygnałowy, odgrywając rolę przeciwzapalną po leczeniu BoNT/A.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *