Testy immunologiczne enzymatyczne (EIA) do serodiagnozy ludzkiej leptospirozy: swoiste izotypowanie IgG3/IgG1 może dodatkowo pomóc w diagnostyce ostrej choroby
Pracochłonny mikroskopowy test aglutynacji (MAT) jest złotym standardem serologicznym w diagnostyce laboratoryjnej leptospirozy. Opracowaliśmy testy serologiczne oparte na EIA z wykorzystaniem białek rekombinowanych (rLigA, rLigB, rLipL32) i ekstraktów całych komórek z ośmiu serotypów Leptospira jako antygenu i oceniliśmy wydajność diagnostyczną nowego testu w każdej klasie w stosunku do paneli surowic ludzkich MAT+ (MAT+) z Portugalia/PT (n = 143) i Angola/AO (n = 100).
Stwierdziliśmy, że kombinacja rekombinowanych białek rLigA, rLigB i rLipL32 prawidłowo zidentyfikowała antygenowo swoiste IgG od pacjentów z klinicznie i laboratoryjnie potwierdzoną leptospirozą (MAT+) z 92% czułością i ~97% swoistością (AUC 0,974) w surowicy z prowincji Luanda (LDA) i Huambo (HBO) w Angoli. Połączenie ekstraktów z całych komórek L. interrogans sv Copenhageni (LiC), L. kirschneri Mozdok (LkM), L. borgpetersenii Arborea (LbA) i L. biflexa Patoc (LbP) pozwoliło dokładnie zidentyfikować pacjentów z klinicznie i laboratoryjnie potwierdzoną leptospirozą (MAT+). ) ze 100% czułością i ~98% specyficznością dla wszystkich prowincji Angola i Portugalia (AUC: 0,997 dla AO/LDA/HBO, 1,000 dla AO/HLA, 0,999 dla PT/AZ i 1,000 dla PT/LIS). Co ciekawe,
Biorąc pod uwagę, że izotypy specyficzne dla klasy IgM/IgD i IgG3/IgG1 powstają w najwcześniejszym przebiegu zakażenia, izotypowanie immunoglobuliny G może być wykorzystane do ustalenia rozpoznania ostrej leptospirozy.
- Szybkość, łatwość użycia i dokładność testów EIA sprawiają, że są one doskonałą alternatywą dla pracochłonnej i drogiej MAT do badań przesiewowych ostrej infekcji w obszarach, w których krążące serotypy patogennej Leptospira są dobrze zdefiniowane.
- W sierpniu 2020 r. nowa epidemia wirusa Zachodniego Nilu (WNV) dotknęła 71 osób z zapaleniem opon mózgowo-rdzeniowych w Andaluzji (Hiszpania). Próbki od tych osób zostały odebrane przez nasze laboratorium, regionalne Centrum Informacji o Wirusach.
- Celem tego badania było porównanie zgodności, czułości i swoistości wyników między testem WNV VIRCLIA IgG i IgM (Vircell, Hiszpania) a testem WNV ELISA IgM i IgG (Euroimmun, Niemcy) oraz porównanie wydajności WNV VIRCLIA IgM i Euroimmun ELISA do diagnostyki płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF).
- Badanie obejmowało 24 próbki płynu mózgowo-rdzeniowego (sparowane z próbkami surowicy) i 247 próbek surowicy od 217 pacjentów z podejrzeniem infekcji WNV (1 lub 2 na pacjenta). Zgodność testów ELISA i CLIA w wykrywaniu IgM i Ig G w surowicy wyniosła odpowiednio 93% (wskaźnik kappa = 0,85) i 96% (wskaźnik kappa = 0,89). Wartości czułości testów ELISA i CLIA dla IgM w próbkach surowicy wyniosły odpowiednio 96,7% i 98,9%, a wartości swoistości odpowiednio 96,4% i 95,4%.
- ll[]l;p[;/.p]lo0Wartości czułości testu ELISA i CLIA dla IgG w próbkach surowicy wyniosły odpowiednio 91,1% i 97%, a wartości swoistości odpowiednio 100% i 98,8%. Wyniki uzyskane za pomocą testów ELISA i CLIA w próbkach płynu mózgowo-rdzeniowego wykazały 75% zgodność między nimi (wskaźnik kappa=0,51). Zgodnie z tymi odkryciami monotest WNV VIRCLIA IgM i IgG zapewnia dokładne jakościowe wykrywanie WNV w próbkach surowicy i płynu mózgowo-rdzeniowego.
W tej pracy pożądane było wprowadzenie nanocząstki polidopaminy (PDA) inspirowanej małżami o biokompatybilnej i reaktywnej charakterystyce powierzchni, charakteryzującej się wysoką nośnością i wywołanym pH zachowaniem uwalniającym jony Fe(III) w celu opracowania bezenzymowego testu kolorymetrycznego.
Katecholowa sieć funkcjonalna PDA może działać jako rusztowanie koordynujące z dużymi ilościami jonów Fe(III) w celu utworzenia NP PDA-Fe(III), których stan koordynacji można dostosować poprzez zmianę wartości pH. W szczególności, NP PDA-Fe(III) można utrzymywać w stanie rozłożonym na trzech współrzędnych w warunkach alkalicznych, podczas gdy silnie obciążone jony Fe(III) mogą być łatwo uwalniane w warunkach kwasowych, aby reagować z żelazocyjankiem w celu wygenerowania in situ pruskiego niebieskie (PB) NP.
Czułość wykrywania antygenu specyficznego dla prostaty (PSA) została znacznie poprawiona dzięki wysokiej aktywności peroksydazy NP PB, która wywołała doskonały efekt katalityczny w reakcji kolorymetrycznej. Ponadto stwierdzono korzystną liniowość w zakresie 0,0005-20 ng mL -1 z dolną granicą wykrywalności 0,84 pg mL -1 (S/N = 3). Ponadto, opracowany bezenzymatyczny test immunologiczny kolorymetryczny wykazał doskonałą selektywność i powtarzalność. Uważa się, że ten proponowany, wolny od enzymów system kolorymetryczny PDA-Fe(III) NP będzie stanowić łatwe i niezawodne narzędzie do czułego wykrywania PSA i innych biomarkerów raka w ludzkiej surowicy.
Jako typowa, klasyczna, ale potężna technologia wykrywania biochemicznego w chemii analitycznej, test immunoenzymatyczny (ELISA) wykazuje doskonałość i szeroką praktyczność w ilościowym oznaczaniu analitów o ultraniskich stężeniach.
However, long incubation time and burdensome laborious multistep washing processes make it inefficient and labor-intensive for conventional ELISA. Here, we propose rod-like magnetically driven nanorobots (MNRs) for use as maneuverable immunoassay probes that facilitate a strategy for an automated and highly efficient ELISA analysis, termed nanorobots enabled ELISA (nR-ELISA). To prepare the MNRs, the self-assembled chains of Fe3O4 magnetic particles are chemically coated with a thin layer of rigid silica oxide (SiO2), onto which capture antibody (Ab1) is grafted to further achieve magnetically maneuverable immunoassay probes (MNR-Ab1s).
We investigate the fluid velocity distribution around the MNRs at microscale using numerical simulation and empirically identify the mixing efficiency of the actively rotating MNRs. To automate the analysis process, we design and fabricate by 3-D printing a detection unit consisting of three function wells. The MNR-Ab1s can be steered into different function wells for required reaction or wishing process.
Corticosterone Enzyme Immunoassay kit |
|||
| K014-H1 | Arbor Assays | 1x96 well plate | 327 EUR |
Aldosterone Enzyme Immunoassay Kit |
|||
| DEIABL242 | Creative Diagnostics | 96T | 855 EUR |
Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| DLR-PGE2-Ge-48T | DL Develop | 48T | 469 EUR |
Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| DLR-PGE2-Ge-96T | DL Develop | 96T | 608 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| RD-PGE2-Ge-48Tests | Reddot Biotech | 48 Tests | 467 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| RD-PGE2-Ge-96Tests | Reddot Biotech | 96 Tests | 646 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| RDR-PGE2-Ge-48Tests | Reddot Biotech | 48 Tests | 488 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| RDR-PGE2-Ge-96Tests | Reddot Biotech | 96 Tests | 676 EUR |
Corticosterone Enzyme Immunoassay kit, 5 plates |
|||
| K014-H5 | Arbor Assays | 5x96 well plate | 1110 EUR |
Cortisone Enzyme Immunoassay kit (One Plate) |
|||
| K017-H1 | Arbor Assays | 1x96 well plate | 370 EUR |
Cortisone Enzyme Immunoassay kit (Five Plate) |
|||
| K017-H5 | Arbor Assays | 5x96 well plate | 1273 EUR |
PGFM Enzyme Immunoassay kit (One Plate) |
|||
| K022-H1 | Arbor Assays | 1x96 well plate | 354 EUR |
PGFM Enzyme Immunoassay kit (Five Plate) |
|||
| K022-H5 | Arbor Assays | 5x96 well plate | 664 EUR |
Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 1 Strip plate |
|||
| K003-H1 | Arbor Assays | 1x96 well plate | 311 EUR |
Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 1 Whole plate |
|||
| K003-H1W | Arbor Assays | 1x96 well plate | 305 EUR |
Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 5 Strip plates |
|||
| K003-H5 | Arbor Assays | 5x96 well plate | 1055 EUR |
Cortisol Enzyme Immunoassay kit - 5 Whole plates |
|||
| K003-H5W | Arbor Assays | 5x96 well plate | 1055 EUR |
Human Estrone-3-Glucuronide (E1G)Enzyme Immunoassay ELISA Kit |
|||
| QY-E05423 | Qayee Biotechnology | 96T | 361 EUR |
Immunoassay Stabilizer |
|||
| 85R-103 | Fitzgerald | 1 liter | 481 EUR |
PGE2 ELISA kit |
|||
| 55R-IB09604 | Fitzgerald | 96 wells | 747 EUR |
PGE2 ELISA kit |
|||
| 55R-IB09648 | Fitzgerald | 96 wells | 697 EUR |
Cystatin C Immunoassay Kit |
|||
| K012-H1 | Arbor Assays | 1x96 well plate | 405 EUR |
11,12-DHET Immunoassay Kit |
|||
| DH4 | Detroit R&D | 1 Kit | 307 EUR |
Immunoassay Stabilizer (BSA free) |
|||
| 85R-103BF | Fitzgerald | 1 liter | 481 EUR |
Sheep PGE2 ELISA Kit |
|||
| ESP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Anserini PGE2 ELISA Kit |
|||
| EAP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Rat PGE2 ELISA Kit |
|||
| ERP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Rabbit PGE2 ELISA Kit |
|||
| ERTP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Monkey PGE2 ELISA Kit |
|||
| EMKP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Mouse PGE2 ELISA Kit |
|||
| EMP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Porcine PGE2 ELISA Kit |
|||
| EPP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Human PGE2 ELISA Kit |
|||
| EHP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Chicken PGE2 ELISA Kit |
|||
| ECKP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Canine PGE2 ELISA Kit |
|||
| ECP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Bovine PGE2 ELISA Kit |
|||
| EBP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
Goat PGE2 ELISA Kit |
|||
| EGTP0019 | Abclonal | 96Tests | 521 EUR |
PGE2 ELISA KIT|Human |
|||
| EF007405 | Lifescience Market | 96 Tests | 689 EUR |
QuickTiter Adenovirus Titer Immunoassay Kit |
|||
| VPK-109 | Cell Biolabs | 100 assays | 705 EUR |
Up-converting Phosphor immunoassay analyzer |
|||
| abx095263-1Machine | Abbexa | 1 Machine | 6105 EUR |
cGMP Direct Immunoassay Kit (Colorimetric) |
|||
| K2066-100 | ApexBio | 100 assays | 529 EUR |
CaspSELECT Caspase 3 Immunoassay Kit |
|||
| 55R-1338 | Fitzgerald | 100 assays | 1022 EUR |
cAMP Direct Immunoassay Kit (Colorimetric) |
|||
| K371-100 | Biovision | 512 EUR | |
cGMP Direct Immunoassay Kit (Colorimetric) |
|||
| K372-100 | Biovision | 512 EUR | |
DetectX® PGE2 Antibody, 13ML |
|||
| C178-13ML | Arbor Assays | 13ML | 927 EUR |
DetectX® PGE2 Antibody, 3ML |
|||
| C178-3ML | Arbor Assays | 3ML | 268 EUR |
DetectX® PGE2 Conjugate, 13ML |
|||
| C179-13ML | Arbor Assays | 13ML | 927 EUR |
DetectX® PGE2 Conjugate, 3ML |
|||
| C179-3ML | Arbor Assays | 3ML | 268 EUR |
Prostaglandin E2 PGE2 ELISA kit |
|||
| EK7124 | BosterBio | 96wells/kit | 478 EUR |
Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| abx575384-96tests | Abbexa | 96 tests | 668 EUR |
Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| 20-abx150373 | Abbexa |
|
|
Prostaglandin E2 (PGE2) CLIA Kit |
|||
| abx196166-96tests | Abbexa | 96 tests | 825 EUR |
Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| abx257150-96tests | Abbexa | 96 tests | 668 EUR |
Prostaglandin E2 (PGE2) CLIA Kit |
|||
| 20-abx490154 | Abbexa |
|
|
PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit |
|||
| EU2554 | FN Test | 96T | 476.25 EUR |
Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| E4637-100 | Biovision | 729 EUR | |
Human Albumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEA2201 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human Ceruloplasmin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEC5201 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human Haptoglobin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEH1003 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human IgA AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEI7001 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human IgG AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEI7200 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human IgM AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEI7301 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Mouse Albumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEMA2201 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human Prealbumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEP2010 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Rat Albumin AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FERA2201 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
CaspSELECT? Caspase-3 Immunoassay Kit (Fluorometric) |
|||
| K163-100 | Biovision | 751 EUR | |
PGE2 Monoclonal Antibody (clone 5A2), 50UG |
|||
| A011-50UG | Arbor Assays | 50UG | 587 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| CEA538Ge-10x96wellstestplate | Cloud-Clone | 10x96-wells test plate | 5359.82 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| CEA538Ge-1x48wellstestplate | Cloud-Clone | 1x48-wells test plate | 529.04 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| CEA538Ge-1x96wellstestplate | Cloud-Clone | 1x96-wells test plate | 712.92 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| CEA538Ge-5x96wellstestplate | Cloud-Clone | 5x96-wells test plate | 2908.14 EUR |
General Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| 4-CEA538Ge | Cloud-Clone |
|
|
Rabbit Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit |
|||
| GA-E0177RB-48T | GenAsia Biotech | 48T | 326 EUR |
Rabbit Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit |
|||
| GA-E0177RB-96T | GenAsia Biotech | 96T | 524 EUR |
ELISA kit for PGE2 (Prostaglandin E2) |
|||
| E-EL-0034 | Elabscience Biotech | 1 plate of 96 wells | 377 EUR |
General PGE2/ Prostaglandin E2 ELISA Kit |
|||
| E0056Ge | Sunlong | 1 Kit | 537 EUR |
Human Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| abx257457-96tests | Abbexa | 96 tests | 668 EUR |
Pig Prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit |
|||
| abx257848-96tests | Abbexa | 96 tests | 825 EUR |
General Prostaglandin E2 ELISA Kit (PGE2) |
|||
| RK00704 | Abclonal | 96 Tests | 521 EUR |
Rat PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit |
|||
| ER1800 | FN Test | 96T | 567.6 EUR |
Sheep PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit |
|||
| ESH0066 | FN Test | 96T | 567.6 EUR |
Human PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit |
|||
| EH4233 | FN Test | 96T | 524.1 EUR |
Mouse PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit |
|||
| EM1503 | FN Test | 96T | 524.1 EUR |
Porcine PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit |
|||
| EP0205 | FN Test | 96T | 567.6 EUR |
Bovine Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089b | Lifescience Market | 96 Tests | 928 EUR |
Chicken Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089c | Lifescience Market | 96 Tests | 928 EUR |
Canine Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089d | Lifescience Market | 96 Tests | 928 EUR |
General Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089Ge | Lifescience Market | 96 Tests | 886 EUR |
Human Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089h | Lifescience Market | 96 Tests | 824 EUR |
Mouse Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089m | Lifescience Market | 96 Tests | 865 EUR |
Porcine Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089p | Lifescience Market | 96 Tests | 928 EUR |
Rat Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089r | Lifescience Market | 96 Tests | 886 EUR |
Rabbit Prostaglandin E2, PGE2 ELISA Kit |
|||
| CELI-66089Rb | Lifescience Market | 96 Tests | 928 EUR |
Nori® Bovine PGE2 ELISA Kit |
|||
| GR112381 | Genorise Scientific | 96-well | 461 EUR |
Nori® Mouse PGE2 ELISA Kit |
|||
| GR117380 | Genorise Scientific | 96-well | 461 EUR |
Nori® Rat PGE2 ELISA Kit |
|||
| GR118236 | Genorise Scientific | 96-well | 461 EUR |
(1-Kit )11,12-EET/DHET Immunoassay Kit |
|||
| DH5 | Detroit R&D | 1 Kit | 307 EUR |
Human Complement C3 AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEC2101 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human Complement C4 AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEC2102 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
Human Fibrinogen (FBG) AssayLite Fluorescent Immunoassay Kit |
|||
| FEF1040 | AssayPro | 96 Well Plate | 396 EUR |
QuickTiter Adenovirus Titer Immunoassay Kit, Trial Size |
|||
| VPK-109-T | Cell Biolabs | 20 assays | 374 EUR |
The actively rotating MNR-Ab1s can enhance the binding efficacy with target analytes at microscale and greatly decrease incubation time. The integrated nR-ELISA system can significantly reduce the assay time, more importantly during which process manpower input is greatly minimized. Our simulation of the magnetic field distribution generated by Helmholtz coils demonstrates that our approach can be scaled up, which proves the feasibility of using current strategy to construct high throughput nR-ELISA detection instrument. This work of taking magnetic micro/nanobots as active immunoassay probes for automatic and efficient ELISA not only holds great potential for point-of-care testing (POCT) in future but also extends the practical applications of self-propelled micro/nanorobots into the field of analytical chemistry.